簡(jiǎn)要描述:
植酸酶測(cè)試盒是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:825
商品詳情:
植酸酶測(cè)試盒測(cè)定意義
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3533 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3533-1 | 50管/24樣 | 可見(jiàn)分光光度法 |
測(cè)定原理
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
血管緊張suⅡ受體Ⅰa型檢測(cè)試劑盒 AgtrⅠa ELISA Kit
血管緊張suⅡ受體2抗體檢測(cè)試劑盒 AT2R-Ab ELISA Kit
血管緊張suⅡ受體1抗體檢測(cè)試劑盒 ATⅡR1 ELISA Kit
血管緊張suⅠ受體抗體檢測(cè)試劑盒 ANG-ⅠR ELISA Kit
血管緊張su檢測(cè)試劑盒 ANG ELISA Kit
血管活性肽酶抑制劑檢測(cè)試劑盒 VPI ELISA Kit
旋毛蟲(chóng)抗體檢測(cè)試劑盒 Trichinella Ab ELISA Kit
雄激su結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒 ABP ELISA Kit
胸腺依賴性抗原檢測(cè)試劑盒 TD-Ag ELISA Kit
五肽檢測(cè)試劑盒 TP-5 ELISA Kit
檢測(cè)試劑盒 Thymosin ELISA Kit
胸腺非依賴性抗原檢測(cè)試劑盒 TI-Ag ELISA Kit
胸腺白血病抗原檢測(cè)試劑盒 TLa ELISA Kit
性別決定區(qū)Y蛋白檢測(cè)試劑盒 SRY ELISA Kit
信號(hào)識(shí)別顆??贵w檢測(cè)試劑盒 SRP ELISA Kit
植酸酶測(cè)試盒100管/96樣含量測(cè)試盒/微量法
50管/48樣脫氫酶(SH)測(cè)試盒/分光光度法
100管/96樣脫氫酶(SH)測(cè)試盒/微量法
50T/48樣脫氫酶測(cè)試盒/比色法
50管/48樣生物堿含量測(cè)試盒/分光光度法
100管/96樣生物堿含量測(cè)試盒/微量法
50管/48樣食品中亞硝鹽含量測(cè)試盒/分光光度法
100T/96S食品中亞硝鹽含量測(cè)試盒/微量法
50T/48S雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒/分光光度法