用途:
用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn) (GB4789.4-2010,《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
原理:
蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀是緩沖劑;具有尿素酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的尿素,產(chǎn)生大量的氨,使培養(yǎng)呈堿性,酚紅指示劑在pH6.8時(shí)呈黃色,pH8.1呈粉紅色;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
配方(每升):
蛋白胨 1g
氯化鈉 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氫鉀 2g
酚紅 0.012g
瓊脂 12g
zui終pH7.2±0.2
使用方法:
1、 稱取本品21g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,待冷卻至50—55℃,每200mL培養(yǎng)基加入經(jīng)過(guò)濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的zui終濃度為2%。分裝無(wú)菌試管,制成斜面。
2、 挑取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物,濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上,置36±1℃培養(yǎng)24h。
3、 于2—4h及24h各觀察一次結(jié)果。培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色時(shí)為陽(yáng)性反應(yīng),顏色不變者為陰性反應(yīng)。如為陰性可繼續(xù)培養(yǎng)觀察至4d。
質(zhì)量控制:
質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h結(jié)果如下 :
菌 名 菌 號(hào) 生長(zhǎng)狀況 培養(yǎng)特征
普通變形桿菌 HK7131 良好 培養(yǎng)基變紅色
大腸埃希氏菌 ATCC25922 良好 培養(yǎng)基不變色
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:250g