酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)影響標(biāo)本處理因素和注意事項(xiàng)
標(biāo)本處理因素
實(shí)驗(yàn)室人員收到標(biāo)本后應(yīng)認(rèn)真查對(duì),對(duì)不符合要求的標(biāo)本和申請(qǐng)單要拘收,合格標(biāo)本要及時(shí)分離血清,避免溶血,提取血清時(shí)不應(yīng)混有大量纖維蛋白或細(xì)胞成分。對(duì)不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始記錄,標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名、日期。ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠從冰箱取出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫,對(duì)冰凍的樣品要融化好,并充分混勻再用。
注意事項(xiàng)
1、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
3、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孔間竄流,造成孔問(wèn)污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4、ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯(cuò)誤。
5、顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過(guò)多,以免顯色過(guò)強(qiáng)。
6、試劑的影響因數(shù):應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用。試劑開(kāi)啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì),,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。過(guò)期的試劑不宜再用,若別無(wú)選擇,ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測(cè),確保結(jié)果的可靠性。